CHE COS’È LA CAPACITAZIONE DELLO SPERMA?
La capacitazione dello sperma è definita come la fase finale che consente agli spermatozoi rilasciati nell’eiaculato di acquisire la capacità di fecondare l’ovulo.
Questo processo avviene naturalmente all’interno del tratto riproduttivo femminile, ma per realizzare una tecnica di riproduzione assistita è necessario mimare queste condizioni in vitro.
Il processo di capacitazione consiste nel separare il plasma seminale dagli spermatozoi, mentre questi ultimi vengono raggruppati in base alla loro motilità e morfologia e incubati con mezzi di coltura che imitano le condizioni in vivo.
TECNICHE DI CAPACITAZIONE DELLO SPERMA
In laboratorio esistono diversi modi per realizzare il processo di capacitazione degli spermatozoi. Presso Phi Fertility utilizziamo metodi diversi a seconda delle caratteristiche del liquido seminale. I principali processi utilizzati sono:
- Gradienti di densità: in una provetta di laboratorio vengono posti vari mezzi di comunicazione, da una densità più alta a una più bassa, e il campione di sperma viene posto sopra. Gli spermatozoi ottimali vengono quindi centrifugati e saranno in grado di passare attraverso queste barriere e raggiungere il fondo della provetta dove verranno poi raccolti per essere utilizzati nelle tecniche di riproduzione assistita, in quanto sono gli spermatozoi con motilità e capacità fecondante progressive.
- Swim-up: per questa tecnica, il campione di sperma viene centrifugato con un terreno di coltura specifico. Questo concentra tutte le cellule dell’eiaculato sul fondo della provetta ed elimina il plasma seminale. Viene quindi aggiunto del terreno di coltura fresco e la provetta viene incubata inclinata per 30-60 minuti. Con questa tecnica gli spermatozoi di buona qualità potranno nuotare verso l’alto e successivamente essere recuperati per la fecondazione.
TECNICHE DI ADDESTRAMENTO SPECIALE
Esistono diverse tecniche di capacitazione dello sperma, le più comuni delle quali sono elencate sopra. Tuttavia, presso Phi Fertility utilizziamo una terza tecnica di capacitazione, indicata per gli spermatozoi con un’elevata frammentazione del DNA a doppio filamento, che provoca un danno interno allo spermatozoo non visibile a occhio nudo e che porta al fallimento dell’impianto, ad aborti ripetuti e a una lenta cinetica embrionale.
- Tecnica microfluidica: consiste in un dispositivo con diversi pozzetti di ingresso e di uscita. Porre il campione di sperma con il terreno di coltura specifico nei pozzetti di ingresso e incubare per 20 minuti. Trascorso questo tempo, si raccolgono gli spermatozoi arrivati nei pozzetti di uscita.
Questo dispositivo è dotato di canali microfluidici in cui gli spermatozoi saranno selezionati in base alla migliore morfologia, alla migliore motilità e alla bassa presenza di frammentazione del DNA.
REM (NUMERO DI SPERMATOZOI MOBILI) E QUALITÀ DELLO SPERMA
Una volta che il seme è stato capacitato, si procede a verificare il risultato del campione. A tal fine, osserviamo al microscopio una goccia del campione ottenuto. Verrà esaminato il numero di spermatozoi recuperati e con motilità rettilinea per millilitro di sperma eiaculato. Questo è noto come REM (numero di spermatozoi mobili).
D’altra parte, con le tecniche di capacitazione degli spermatozoi riusciamo a migliorare il campione seminale, in quanto scartiamo gli spermatozoi immotili e qualsiasi tipo di cellula diversa dagli spermatozoi, siano esse cellule epiteliali, leucociti, ecc. che possono interferire negativamente con i risultati delle tecniche di riproduzione.
Otterremo inoltre un campione con una migliore motilità e morfologia e una minore frammentazione del DNA.
FORMAZIONE DELLO SPERMA E TECNICHE DI RIPRODUZIONE
Infine, la capacitazione degli spermatozoi non viene utilizzata solo per l’uso diretto nelle tecniche di riproduzione assistita, come l’IA o la FIV, ma anche come test diagnostico per l’infertilità maschile.
Normalmente l’analisi del seme capacitato viene effettuata tramite swim-up e il risultato ottenuto ci darà un’idea della tecnica di riproduzione assistita che potremo utilizzare in futuro:
- Un EMR superiore a 5 mill/ml sarebbe indicato per l’inseminazione artificiale.
- Un EMR compreso tra 1 e 3 mill/ml sarebbe indicato per la FIV convenzionale.
- Un EMR inferiore a 1 mill/ml sarebbe indicato per l’ICSI.
